إنزيم النسخ العكسي أو المنتسخة العكسية (بالإنجليزية: Reverse transcriptase or RT) هو إنزيم يستخدم لتوليد الحمض النووي التكميلي (cDNA) من قالب الحمض النووي الريبي، وهي عملية تسمى النسخ العكسي. يستخدم النسخ العكسية بواسطة فيروسات مثل فيروس نقص المناعة البشرية والتهاب الكبد B لتكرار جينوماتها، عن طريق العناصر الوراثية المتنقلة التي تنتقل عبر جينوم المضيف، وعن طريق الخلايا حقيقية النواة لتمديد التيلوميرات في نهايات كروموسوماتها الخطية. خلافًا للاعتقاد السائد، لا تنتهك العملية تدفق المعلومات الجينية كما هو موصوف في العقيدة المركزية الكلاسيكية، حيث من الممكن صراحة نقل المعلومات من الحمض النووي الريبي إلى الحمض النووي.
يحتوي إنزيم النسخ العكسي على ثلاثة أنشطة كيميائية حيوية متتابعة: نشاط بوليميريز DNA المعتمد على الحمض النووي الريبي، وريبونوكلياز H RNase H، ونشاط بوليميراز الحمض النووي. بشكل جماعي، تمكن هذه الأنشطة الإنزيم من تحويل الحمض النووي الريبي أحادي الجديلة إلى (كدنا) مزدوج الشريطة. في الفيروسات القهقرية واللينقولات العكسية، يمكن أن يندمج هذا الحمض النووي (cDNA) في جينوم المضيف، والذي يمكن من خلاله عمل نسخ جديدة من الحمض النووي الريبي عبر نسخ الخلايا المضيفة. يستخدم نفس تسلسل التفاعلات على نطاق واسع في المختبر لتحويل الحمض النووي الريبي إلى الحمض النووي لاستخدامه في الاستنساخ الجزيئي أو تسلسل الحمض النووي الريبي أو تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) أو تحليل الجينوم.