مسجد بئر السبع الكبير هو من أوائل المساجد التي بُنيت في النقب، ويقع إلى جانب منزل الحاكم في البلدة القديمة، كما يُعتبر جزءًا من مجمع متحف النقب للفنون، إضافة إلى أنه يمتاز بتصميم معماري مُشابه للمساجد التي بُنيت في مختلف أنحاء الإمبراطورية العثمانية، وهو مستوحى من كنيسة آيا صوفيا البيزنطية التي تم تحويلها إلى مسجد من قبل الأتراك، فضلاً عن أنه يُعدّ من أبرز المباني وأكثرها روعة وإثارة للإعجاب في المنطقة، وهو ينسجم بمئذنته الحجرية وقبته البيضاء مع الطراز المعماري للبيوت العربية القديمة، ويُشكِّلُ أحد أهمّ المعالم المعماريّة الباقية من العصر العثماني.
يقع مسجد بئر السبع الكبير في مركز مدينة بئر السبع القديمة وهو مُحاط بمبنى السرايا، ومدرسة أبناء مشايخ بدو بئر السبع، وبيت المؤرخ عارف العارف.