الدليل الشامل لـ تسلسل سانغر

تسلسل سانغر طريقة لتحديد تسلسل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (الدنا) تعتمد على الفصل الكهربائي، وتستند إلى الإدراج العشوائي للديوكسي نوكليوتيدات التي تُوقف السلسلة بواسطة إنزيم بوليمراز الدنا في أثناء عملية تضاعف الدنا في المختبر. طُورت هذه الطريقة لأول مرة من قبل فريدريك سانغر وزملائه عام 1977، وأصبحت الطريقة الأكثر استخدامًا لتحديد تسلسل الدنا لمدة تقارب 40 عامًا. في مارس 1987، طُرح أول جهاز آلي يعتمد على الفصل الكهربائي الهلامي الصفيحي والعلامات الفلورية في الأسواق من قبل شركة أبلايد بيوسيستيمز. لاحقًا، استُبدلت هذه الأجهزة الآلية بأنظمة الفصل الكهربائي الشعري الآلية. في الآونة الأخيرة، استُبدل تسلسل سانغر واسع النطاق بتقنيات الجيل التالي لتحديد تسلسل الدنا، خاصةً في التحليلات الجينومية الآلية واسعة النطاق. مع ذلك، ما تزال طريقة سانغر تُستخدم على نطاق واسع في المشاريع الأصغر وفي التحقق من نتائج التسلسل العميق. تتمتع هذه الطريقة بميزة مقارنةً بتقنيات التسلسل قصيرة القراءة، مثل إلومينا، إذ يمكنها إنتاج قراءات لسلاسل دنا يتجاوز طولها 500 نوكليوتيد، مع معدل خطأ منخفض جدًا ودقة تصل إلى نحو 99.99%. ما يزال تسلسل سانغر يُستخدم بنشاط في مبادرات الصحة العامة، مثل تحديد تسلسل البروتين الشوكي لفيروس كورونا المرتبط بالمتلازمة التنفسية الحادة الشديدة النوع 2 (سارس كوف-2)، بالإضافة إلى مراقبة تفشي نوروفيروس عبر شبكة المراقبة كالسينت التابعة لمراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها.