تجربة تطور الإشريكية القولونية طويلة الأمد هي دراسة مستمرة في علم التطور التجريبي يقوم بها فريق من العلماء بقيادة ريتشارد لينسكي تركز على دراسة التطورات الوراثية في 12 مجموعة كانت متماثلة تتكاثر لاجنسيا من بكتيريا إشريكية قولونية (E. coli). بدأت التجربة في 24 فبراير 1988، ووصلت البكتيريا إلى الجيل 50,000 في فبراير 2010، و60,000 في أبريل 2014.
منذ بدأ التجربة لاحظ لينسكي وزملائه عدد كبير من التغيرات الوراثية، بعضها تطورات ملائمة ظهرت في جميع العينات الاثنا عشر، بينما تطورات أخرى ظهرت فقط في بعض العينات. أحد أهم التطورات كان قدرة الإشريكية القولونية على استخدام حمض الليمون للحصول على الكربون في البيئة الهوائية.