تعددت الاستخدامات البشرية للخفافيش كما انها تشمل الاستخدامات الاقتصادية مثل لحوم الطرائد والطب التقليدي. كما تستخدم الخفافيش كرمز للأديان، والأساطير، والخرافات والفنون. تستخدم الخفافيش أيضا في الطب، كعلاج لصرع في أمريكا الجنوبية، والعمى الليلي في الصين، والروماتيزم، والربو، وآلام الصدر، والحمى في جنوب آسيا. يستهلك لحم الخفاش في العديد ن الدول منها، أوقيانوسيا، أستراليا، اسيا، وأفريقيا بنسبة 13% من اجمالي فصائل الكائنات الحية التي تصطاد للأكل. كما تستخدم أيضا لأغراض اقتصادية أخرى مثل استخدام اسنانها كعملة في جزيرة ماكيرا.
ترمز الخفافيش بشكل واسع إلى عالم الفن مع شموليتها للقصائد الملحمية، والمسرحيات، والأساطير والقصص المصورة، وعلى الرغم من اتصالها بالحقد في الفن الغربي إلا أنها ترمز إلى السعادة في الصين.